<pre id="x5b11"></pre>
<ruby id="x5b11"></ruby>
<p id="x5b11"><del id="x5b11"></del></p>

      <p id="x5b11"><del id="x5b11"></del></p>

      <pre id="x5b11"><b id="x5b11"></b></pre>

          <pre id="x5b11"></pre>
          技術文章您的位置:網站首頁 >技術文章 > 透射電鏡樣本準備方法及要求
          透射電鏡樣本準備方法及要求
          更新時間:2023-12-27   點擊次數:327次

          以下所有樣本必須新鮮,固定液或懸浮液都不得冷凍結冰!

           

          1、 動物組織樣本

            1-3min內取樣,取材前可提前準備裝有電鏡固定液的培養皿,將小組織塊離體取下后立即投入培養皿內,用手術刀在培養皿的固定液中進行切割成小塊,取樣組織體積控制在以下尺寸(1mmX1mm×1mm正方體、1mm×1mm×3mm長方體狀、1mm×2mm×3mm薄片狀)。固定液滲透能力有限,超出此范圍后組織會無法

          透射電鏡圖片.png

          固定,后續實驗無法完成,務必請重視此過程。

           


            取材時盡量精確到需要觀察的目的部位(如觀察腎小球取腎皮質;觀察胰島取胰島豐富的胰尾;皮膚,腸胃等在固定液中易打卷的組織可將組織粘在濾紙上進行固定)。

            取材時一定注意避免鑷子擠壓等機械損傷,刀片要鋒利避免挫傷組織。

            組織取下后立即投入電鏡固定液內4度避光固定24h,再轉移至4°保存,4°冰袋運輸,在保存和運輸過程中固定液切勿冷凍結冰。4°時樣本可保存1個月左右

          2、 植物組織樣本

            取材要求同動物組織樣本。

            組織投入固定液后需要進行真空抽氣讓組織沉底,如無條件抽氣可用濾紙將組織塞進固定液內,組織不能漂浮在固定液表面。(抽氣做出來的效果會好一些)

          3、 細胞樣本

          貼壁細胞:

          (看細胞凋亡的,需要把培養液中的細胞也離心收集后固定)

          方法一:消化法(實驗目的不涉及觀察細胞膜相關的內容  如:觀察緊密連接)

          ①培養好的細胞(細胞密度不超過70%)棄培養基,加入胰酶消化。

          ②胰酶消化好后(時間不宜過長),加培養基終止消化,吸管輕輕吹打至細胞起浮。吸入離心管,低速離心(不超過3000轉),3-5min左右,細胞團要有綠豆大小。

          ③棄上清,加入電鏡固定液,細胞團吹散重懸。

          4度避光固定24h,再轉移至4°保存,4°冰袋運輸,在保存和運輸過程中固定液切勿冷凍結冰。

          方法二:刮取法

          ①培養好的細胞(細胞密度不超過70%)棄培養基,加入電鏡固定液(固定液需提前恢復至室溫)。

          ②常溫避光固定5min左右,用細胞刮(或軟橡膠蓋切得平整小方塊)沿一個方向輕輕刮下細胞,切記不要反復刮,避免細胞刮破。

          ③用巴氏吸管把細胞液吸入離心管內,放入離心機(不超過3000轉),低速離心3-5min左右,細胞團要有綠豆大小。

          ④棄固定液后加新的電鏡固定液,細胞團吹散重懸。

          4度避光固定24h,再轉移至4°保存,4°冰袋運輸,在保存和運輸過程中固定液切勿冷凍結冰。

          懸浮細胞:離心收集細胞要肉眼可見細胞沉淀有綠豆大小,棄培養基后加電鏡固定液4度避光固定24h,再轉移至4°保存,4°冰袋運輸,在保存和運輸過程中固定液切勿冷凍結冰。

           

          4、 細菌樣本

          長于固體培養基的細菌:連帶著培養基一起挑下細菌放于電鏡固定液內4度避光固定24h,再轉移至4°保存, 4°冰袋運輸,在保存和運輸過程中固定液切勿冷凍結冰。

           

          懸浮細菌孢子等:離心收集細菌要肉眼可見細菌沉淀綠豆大小,棄培養基后加電鏡固定液4度避光固定24h,再轉移至4°保存,4°冰袋運輸,在保存和運輸過程中固定液切勿冷凍結冰。

          5、 病毒

          破碎組織細胞,粗離心去除細胞碎片取上清,超速離心分離出病毒(病毒提取的過程需要客戶自己完成)。用緩沖液(如PBS)懸浮病毒,體積至少50ul,遠距離干冰凍存運輸,近距離4°保存運輸,盡快滴片做負染后及時電鏡觀察拍照。(噬菌體 4度運輸)

          6、 外泌體囊泡等

          客戶自己完成外泌體囊泡等的提取收集,用緩沖液(如PBS)或者試劑盒中的保存液懸浮,,體積至少50ul,遠距離干冰凍存運輸,近距離4°保存運輸,盡快制片做負染后及時電鏡觀察拍照。(因此類樣品極易降解,樣品越新鮮越好,最好數小時內完成滴片負染,否則做出的效果很不理想甚至觀察不到)

          7、 納米材料等無機材料

          直接準備粉劑,或用純水或無水乙醇懸浮,常溫保存運輸即可(需要超聲的備注)。做負染后電鏡觀察拍照。


          ©2024  上海創凌生物科技有限公司 All Rights Reserved.  網站地圖  滬ICP備2023009255號-1  管理登陸  技術支持:化工儀器網
          在線客服 二維碼

          掃一掃,關注我們

          日韩精品乱码AV一区二区,娇妻被黑人粗大高潮白浆,自拍影视亚洲欧美,久久国产毛片女三十

          <pre id="x5b11"></pre>
          <ruby id="x5b11"></ruby>
          <p id="x5b11"><del id="x5b11"></del></p>

              <p id="x5b11"><del id="x5b11"></del></p>

              <pre id="x5b11"><b id="x5b11"></b></pre>

                  <pre id="x5b11"></pre>